本规程适用于模块加热的聚合酶链反应（PCR）分析仪温度相关计量性能的校准，对于其他类型的 PCR 仪温度相关计量性能的校准，可参照本规范执行。
- 校准项目
校准项目包含：温度示值误差、温度均匀度、平均升温速率、平均降温速率。
3 校准点的选取
校准点依据参考：JJF1527-2015 聚合酶链反应分析仪校准规范
校准点一般为 30℃，50℃，60℃，70℃，90℃，95℃。
校准点也可依据客户要求。
- 校准方法
4.1 温度示值误差、温度均匀度校准
4.1.1 将 PCR 仪及温度校准装置各部件连接完好，在温度传感器表面上涂抹适量导热油，按图 1 所示将温度传感器置于 PCR 仪加热模块中，其他型号的 PCR 仪可参照该图 1 进行测试。
图 1 温度传感器布点示意图
4.1.2 参照送检单位提供的 PCR 仪产品使用说明书设定被校 PCR 仪的温度控制程序，如表 1 所示，并运行。不能设定为温控程序起点的 PCR 仪，温控程序参照表 1 进行设定。
表 1 PCR 仪温度控制程序标准程序表
步骤 |
设定温度点 |
设定温度持续时间 |
1 |
30°C |
1min |
2 |
95°C |
3min |
3 |
30°C |
2min |
4 |
90°C |
3min |
5 |
50°C |
3min |
6 |
70°C |
3min |
7 |
60°C |
3min |
8 |
30°C |
1min |
4.1.3 启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
4.1.4 温度示值误差校准结果按公式（1）和公式（2）计算：
=
式中：
——温控装置工作区域内温度示值误差，℃；
——温控装置工作区域内设定温度值，℃；
——所有测温传感器测定值的平均值，℃；
——第 i 个温度传感器测定值，℃。
4.1.5 温度均匀度校准结果按公式（3）计算：
式中：
：温度均匀度，℃。
：各测量点在第 j 次测量中的实测最高温度，℃。
：各测量点在第 j 次测量中的实测最低温度，℃。
- 升降温速率校准
4.2.1 参照送校单位提供的 PCR 仪说明书设定该 PCR 仪的温度控制程序，如表 2 所示。启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
表 2 PCR 仪温度控制程序标准程序表
步骤 |
设定温度点 |
设定温度持续时间 |
1 |
45°C |
3min |
2 |
95°C |
3min |
3 |
45°C |
3min |
4.2.2 记录仪器显示温度达到设定温度恒温 10s 后，取 50℃温度点，温度记为 TA，取 90℃温度点，温度记为 TB，从 TA 到达 TB 的时间记为 t，按图 2 所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：
式中：
——平均升温速率，℃/s；
——50℃温度点测量值，℃；
——90℃温度点测量值，℃；
——从 TA 到达 TB 的时间，s。
4.2.3 取 90℃温度点，温度记为 TA，取 50℃温度点，温度记为 TB，从 TA 到达 TB 的时间记为 t，按图 2 所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：
式中：
——平均升温速率，℃/s；
——90℃温度点测量值，℃；
——50℃温度点测量值，℃；
——从 TA 到达 TB 的时间，s。
- 操作步骤
5.1 接通 PCR（基因扩增仪）电源，开启 PCR（基因扩增仪），校准前需将 PCR 开机预热 30min。
5.2 温度示值误差、温度均匀度校准
5.2.1 将 PCR 仪及温度校准装置各部件连接完好，在温度传感器表面上涂抹适量导热油，按图 1 所示将温度传感器置于 PCR 仪加热模块中，其他型号的 PCR 仪可参照该图 1 进行测试。
图 1 温度传感器布点示意图
5.2.2 参照送检单位提供的 PCR 仪产品使用说明书设定被校 PCR 仪的温度控制程序，如表 1 所示，并运行。不能设定为温控程序起点的 PCR 仪，温控程序参照表 1 进行设定。
表 1 PCR 仪温度控制程序标准程序表
步骤 |
设定温度点 |
设定温度持续时间 |
1 |
30°C |
1min |
2 |
95°C |
3min |
3 |
30°C |
2min |
4 |
90°C |
3min |
5 |
50°C |
3min |
6 |
70°C |
3min |
7 |
60°C |
3min |
8 |
30°C |
1min |
5.2.3 启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
5.2.4 温度示值误差校准结果按公式（1）和公式（2）计算：
=
式中：
——温控装置工作区域内温度示值误差，℃；
——温控装置工作区域内设定温度值，℃；
——所有测温传感器测定值的平均值，℃；
——第 i 个温度传感器测定值，℃。
5.2.5 温度均匀度校准结果按公式（3）计算：
式中：
：温度均匀度，℃。
：各测量点在第 j 次测量中的实测最高温度，℃。
：各测量点在第 j 次测量中的实测最低温度，℃。
5.3 升降温速率校准
5.3.1 参照送校单位提供的 PCR 仪说明书设定该 PCR 仪的温度控制程序，如表 2 所示。启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
表 2 PCR 仪温度控制程序标准程序表
4.2.2 记录仪器显示温度达到设定温度恒温 10s 后，取 50℃温度点，温度记为 TA，取 90℃温度点，温度记为 TB，从 TA 到达 TB 的时间记为 t，按图 2 所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：
式中：
——平均升温速率，℃/s；
——50℃温度点测量值，℃；
——90℃温度点测量值，℃；
——从 TA 到达 TB 的时间，s。
5.3.3 取 90℃温度点，温度记为 TA，取 50℃温度点，温度记为 TB，从 TA 到达 TB 的时间记为 t，按图 2 所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：
式中：
——平均升温速率，℃/s；
——90℃温度点测量值，℃；
——50℃温度点测量值，℃；
——从 TA 到达 TB 的时间，s。